Анотація

Виразкова хвороба (PUD) - одне з найпоширеніших захворювань шлунково-кишкового тракту, що вражає 5-10% населення у всьому світі [1,2]. Він характеризується ураженням слизової оболонки із запальною інфільтрацією клітин та коагуляційним некрозом [3]. PUD є складною хворобою з безліччю факторів, що сприяють, та неясною етіологією [4]. Вважається, що PUD зумовлений головним чином дисбалансом між агресивними та захисними факторами, що впливають на слизову оболонку шлунка, що призводить до пошкодження виразки [3,5]). Пепсин, HCl, реакційноздатні вільні радикали та кип'ятіння жовчі є одними з агресивних факторів [6], тоді як бікарбонат, виділення слизу, кровотік слизової оболонки, оксид азоту (NO), простагландини (PG), а також ферментативні та неферментативні антиоксиданти - деякі. оборонних факторів [6,7]. Наприклад, кілька інших факторів сприяють етіології прогресування виразки, Хелікобактер пілорі (H. pylori) інфекція, куріння, надмірне вживання нестероїдних протизапальних препаратів або алкоголю та психологічний стрес [8,9]. Надмірне вживання алкоголю, мабуть, підвищує ризик серйозних виразок слизової оболонки верхніх відділів шлунково-кишкового тракту та кровотеч.

Як правило, лікування пептичної виразки включає використання препаратів, що пригнічують секрецію шлункової кислоти та/або викорінюють H. pylori [9]. Однак ефективність поточної терапії не є абсолютною, і тривале застосування пов'язане з побічними ефектами та рецидивом виразки [10,11]. Ліки рослинного походження стають все більш уподобаними, оскільки, як очікується, природна речовина сприятиме загоєнню та полегшенню хвороб, як правило, без значних несприятливих наслідків [12].

Натуральний бджолиний мед зазвичай випробовували як захисний засіб у багатьох експериментальних моделях PUD [13,14]. Подібним чином кілька екстрактів лікарських рослин, відомих своїми антиоксидантними властивостями, широко досліджувались як гастропротекторні засоби [15,16].

Fagoniaindica (сімейство Zygophyllaceae) - це невеликий зелений колючий підкущ, широко поширений у теплих районах Азії та Африки [17]. Традиційно ця рослина застосовується завдяки своїм протизапальним, жарознижувальним та знеболюючим властивостям [18]. У попередньому дослідженні автори повідомляли, що рослина може вважатися безпечною і що вона містить різноманітні біоактивні флавоноїди, стерини та тритерпеноїди [19]. Рослина також багата сапонінами, дубильними речовинами та серцевими глікозидами [20]. Встановлено, що спиртовий екстракт цілої рослини виявляє протимікробну, протипухлинну та знеболюючу активність. Встановлено, що більшість його задокументованої біологічної активності в основному пов'язані з глікозидами сапоніну, тритерпеноїдними сапонінами, флавонолами та розмариновою кислотою [19].

Метою цього дослідження було переоцінити на тваринній моделі гастропротекторні ефекти натурального розчину меду та перевірити можливі захисні ефекти Fagonia indica спиртовий екстракт як гастрозахисний нетрадиційний засіб. Гастропротекторні ефекти оцінювали за допомогою виразкового індексу та розрахованого захисного індексу, а також гістопатологічного дослідження. Індукована алкоголем виразка шлунка у щурів проводилася як модель для імітації PUD у людей.

2.1 Fagonia indica спиртовий екстракт

Цілу рослину було зібрано протягом вересня 2015 року з району Мухайсна 1, Дубай. Рослина була люб’язно ідентифікована та засвідчена професором Хасснаа Ахмедом Хосні, кафедра ботаніки, факультет наук Каїрського університету, Єгипет. Зразки ваучерів зберігалися в Гербарії кафедри фармакогнозії, фармацевтичному факультеті Каїрського університету та в Дубайському фармацевтичному коледжі. Рослина сушили на повітрі, подрібнювали в порошок (500 г), а потім мацерували у 70% спирті. Після фільтрування фільтрат упарюють при 50 ° C за допомогою роторного випарника і залишок (75 г) збирають для біологічного дослідження. Розчин екстракту готували свіжим шляхом розчинення залишку в 1% карбоксиметилцелюлози (КМЦ). Дослідження гострої токсичності Fagonia indica спиртовий екстракт був раніше досліджений авторами [19].

2.2 Медовий розчин

Для цього дослідження був використаний чистий, необроблений, неварений комерційний мед, отриманий на сільськогосподарському факультеті, Каїр, Єгипет. Мед досліджували, хімічно випробовували та виявляли, що він не містить перевернутого цукру, рідкої глюкози або декстрану. Для експериментів готували свіжий 10% -ний об'ємний розчин з дистильованою водою.

3.1 Антиульцерогенна активність

Щурів забивали під ефірною анестезією через 1 годину після введення етанолу. Шлунок видаляли і розкривали вздовж більшої кривизни, потім промивали сольовим розчином для видалення згустків крові та шлункового вмісту, перш ніж фіксувати на картоні для дослідження грубих уражень шлунка. Шар слизової оболонки шлунка ретельно оглядали за допомогою освітленої збільшувальної лінзи на предмет появи виразок, які вимірювали для їхньої індивідуальної довжини. Більше того, кожні ураження шлунка оцінювались наступним чином: 0 = нормальний колір шлунка, 0,5 = червоне забарвлення, 1 = плямиста виразка, 1,5 = смуги довжиною 5 мм.

Згідно з [21], сума тривалостей усіх уражень (у міліметрах) у кожному шлунку розглядалася як індекс виразки (UI). Оцінка виразки (УЗ) була розрахована як середній бал виразок/шлунка в кожній групі [22]. Профілактичний індекс препарату - це відсоток інгібування пошкодження слизової оболонки шлунка порівняно з контрольними нелікованими результатами [23]. Він обчислюється за наступною формулою

P I% = [UI E T O H - UI T R E A T E D UI E T O H] × 100

4.1 Гістопатологічне дослідження

Зразки шлунка фіксували за допомогою 10% формальдегіду для гістопатологічного дослідження. Ці тканини обробляли і вкладали у парафіновий віск. Зрізи товщиною 5 мкм вирізали і фарбували гематоксиліном та еозином [24].

4.2 Статистичний аналіз

Дані збирали за допомогою Microsoft Excel, аналізували за допомогою програми SPSS (версія 24) і представляли як засоби + SEM. Порівняння середніх значень кожної двох груп проводили за допомогою t-критерію студента.

У цьому дослідженні застосовували етанол-індуковану виразкову модель у самців щурів-альбіносів. Пероральне введення 80% етанолу голодним щурам спричиняло великі виразки на слизовій оболонці шлунка порівняно із шлунком, виділеним від звичайних щурів. Це видно з макроскопічного дослідження виразки (рис. 1А та рис. 1В), а індекс виразки у цій групі становив 161,64 ± 14,40 мм порівняно з 2,18 ± 0,56 мм у нормальній групі, яка не отримувала етанол (рис. 2). Більше того, показник виразки, розрахований за системою підрахунку балів, описаною в методології, виявив оцінку до 46,5 для етанолірованих щурів, тоді як нормальний показник щурів становив 2 (рисунок 2).

Обробка щурів протягом 14 днів або розчином меду, або Fagonia indica спиртовий екстракт був ефективним у зменшенні уражень шлунка у досліджуваних дозах, що продемонстровано на зразкових знімках слизової оболонки шлунка (рис. 1С та рис. 1D). Обробка обома агентами призвела до значно нижчих показників виразки порівняно з необробленою групою (49,47 ± 3,21 мм та 18,22 ± 1,66 мм) для оброблених медом та Fagonia indica-групи, які отримували лікування (рис. 2). Захист шлунку (розрахований профілактичний індекс) розчином меду становив до 69% і був значно більшим при Fagonia indica досягати 89%, як показано в табличних даних на малюнку 2.

Під час гістопатологічного дослідження на зрізах шлунку тварин, оброблених етанолом, виявлено виражену геморагічну ерозію слизової оболонки та забруднення некротичних клітин. Власна пластинка набрякла, перевантажена та інфільтрована гострими запальними клітинами разом з одноядерними клітинами та навантаженими гемосидерином макрофагами. Області крововиливів очевидні (Малюнок 3А та Рисунок 3В). З іншого боку, зрізи, взяті з шлунка тварин, оброблених медом, або Fagonia indica тварини, що отримували лікування, виявляли мінімальну вогнищеву ерозію, легкий запальний клітинний інфільтрат, помітно менше застійних явищ та набряків порівняно з групою, обробленою етанолом (рис.

Відомо, що етанол пошкоджує слизову шлунка шляхом збільшення інфільтрації лейкоцитів, зменшення кровотоку слизової оболонки та перевиробництва вільних радикалів [25]. Розчинення бікарбонату та слизу етанолом може також сприяти погіршенню дії етанолу [26]. Дійсно, у ранньому дослідженні було продемонстровано, що введення екзогенних простагландинів забезпечує дозозалежний захист від пошкодження слизової шлунка, спричиненого алкоголем у щурів [27].

Оцінка захисних ефектів як розчину меду, так і Fagonia indica спиртовий екстракт, проведений у цьому дослідженні, базувався на двох основних критеріях; а саме., макроскопічне дослідження з визначенням виразкового індексу, показника виразки та індексу захисту та мікроскопічне дослідження зразків шлунку з різних груп з ідентифікацією гістопатологічних висновків.

Захисні результати, отримані в даному дослідженні для розчину меду проти уражень, спричинених етанолом, відповідають багатьом попереднім дослідженням, які продемонстрували гастропротекторну активність кількох видів меду, одно- або багатофлорного, і з різним ботанічним походженням [28,29]. . Було продемонстровано, що мед має значні гастропротекторні та антимікробні властивості, включаючи пригнічення росту H. pylori [13]. Дослідження противиразкової активності меду у щурів прийшло до висновку, що мед відновлює ендогенні антиоксиданти, уповільнює перекисне окислення ліпідів та зберігає рівень вироблення слизу завдяки збільшенню вироблення глікопротеїдів слизової оболонки та збереженню глутатіону слизової шлунка [14].

На закінчення захисний ефект медового розчину підтверджується в викликаній етанолом виразці шлунка у щурів. З іншого боку, значний захисний ефект Fagonia indica спиртовий екстракт є абсолютно новою знахідкою цієї дослідницької роботи, оскільки раніше не було продемонстровано, що цей конкретний вид мав гастропротекторну дію в такій експериментальній моделі. І мед, і Fagonia indica виявляють свої сприятливі ефекти, ймовірно, завдяки механізмам виробництва антиоксидантів та слизу, завдяки чому вони обидва багаті флавоноїдами, таким чином потрапляючи до категорії цитопротекторних засобів. Порівняно один з одним, сприятливий ефект від Fagonia indica Екстракт виявився значно вищим, ніж розчин меду, як виявили загальні параметри обстеження. З іншого боку, на мікроскопічному рівні переваги як медового розчину, так і рослинного екстракту були рівноцінними.

Подальші механістичні дослідження необхідні для розкриття молекулярного механізму захисту шлунку та виділення активних компонентів Fagonia indica які можуть бути конкретно відповідальними за захисну дію від пошкодження слизової.

Автори заявляють, що у них немає конкуруючих інтересів.