Вплив прополісу, маточного молочка, меду та бджолиного пилку на ефективність росту та імунну систему японських перепелів

Сакіне Бабаї

1 кафедра птахівництва сільськогосподарського факультету університету Тарбіат Модарес, Тегеран, Іран;

вплив

Шаебан Рахімі

1 кафедра птахівництва сільськогосподарського факультету Університету Тарбіат Модарес, Тегеран, Іран;

Мохаммад Амір Карімі Торшизі

1 кафедра птахівництва сільськогосподарського факультету Університету Тарбіат Модарес, Тегеран, Іран;

Голамосеїн Тахмасебі

2 Відділ досліджень медоносних бджіл та шовкопрядів, Науково-дослідний інститут тваринництва, Карадж, Іран.

Сайєд Насер Халегі Міран

1 кафедра птахівництва сільськогосподарського факультету університету Тарбіат Модарес, Тегеран, Іран;

Анотація

Оцінено вплив етанольного екстракту прополісу, маточного молочка, меду та пилку бджіл у порівнянні з віргініаміцином (як антибіотик, що стимулює ріст) на ефективність та імунну систему японських перепелів. Ми використали 256 змішаних статевих перепелиних курчат у повністю рандомізованому дизайні за восьми обробок, включаючи контроль, етанольний екстракт прополісу 1000 (PE1) та 5000 (PE2) мг кг -1, пилковий порошок 1000 (PO1) та 5000 (PO2) мг кг -1, маточне молочко 100 мг кг -1 (RJ), мед 22 г L -1 питної води (H) і віргініаміцин 150 мг кг -1 (V), а також чотири копії восьми птахів у кожній реплікації протягом 42 днів . Існували суттєві відмінності між збільшенням ваги (WG), споживанням корму (FI) та коефіцієнтом конверсії корму (FCR) між експериментальними групами. Крім того, РГ у лікуванні V (18,82%), лікування Н і PO2 (16,87%) та лікування РЖ (12,00%) були значно вищими, ніж у контрольної групи (p Ключові слова: Імунітет, опосередкований клітинами, перетворення кормів, продукти медоносної бджілки, гуморальний імунітет

Вступ

Метою цього дослідження було визначити вплив маточного молочка, меду, бджолиного пилку та спиртового екстрагованого прополісу на працездатність та імунну систему японських перепелів.

Матеріали та методи

Птахи та тваринництво. В експерименті взяли участь 256 одноденних перепелиних пташенят. Їх зважували індивідуально і випадковим чином розподіляли на вісім дієтичних процедур, щоб кожна експериментальна одиниця мала однакову середню вагу та розподіл восьми птахів. Експериментальні групи, що складаються з: контрольної дієти (не доповнена), етанольного екстракту прополісу 1000 мг кг -1 (PE1) та 5000 мг кг -1 (PE2), пилкового порошку 1000 мг кг -1 (PO1) та 5000 (PO2) мг кг -1, маточне молочко 100 (RJ) мг кг -1, мед 22 г L -1 (H) та віргініаміцин 150 мг кг -1 (V). Пташенят перепелів утримували в клітках (40 × 32 см 2). Експериментальні дієти годували з 1-42-денного віку. Корм і вода були доступні за бажанням. Дієти були розроблені на основі сої-кукурудзи, щоб відповідати або перевищувати вимоги NRC. 18 Дослідні групи замінювали піском під час дієт протягом періодів вирощування. Склад інгредієнтів та аналіз поживних речовин описані в таблиці 1 .

Таблиця 1

Склад експериментальної дієти

Інгредієнти Відсоток дієти
Кукурудза 50,70
Соєвий шрот 42,52
Рослинна олія 2,00
Ди-кальцій фосфат 0,72
Карбонат кальцію 1,25
Сіль 0,33
Вітамінний премікс 1 0,25
Мінеральний премікс 2 0,25
DL-метіонін 0,13
L-треонін 0,11
Пісок 1,74
Склад поживних речовин
Енергія, що піддається метаболізму (ккал кг -1 ) 2800
Сирий білок (%) 23.00
Кальцій (%) 0,77
Доступний фосфор (%) 0,29
Натрій (%) 0,15
Метіонін (%) 0,48
Метіонін + Цистеїн (%) 0,85
Лізин (%) 1.28
Треонін (%) 0,98

Підготовка та відбір зразків. Прополіс, пилок, маточне молочко та мед збирали медоносні бджоли, Науково-дослідний інститут тварин, Карадж, Іран. Прополіс висушували в темряві до переробки. Готували 30,00% настоянку прополісу, додаючи 600 г прополісу до 1400 мл 70,00% етанолу (мас./Об.). Це перемішували і зберігали в скляній ємності, струшували двічі на день, фільтрували через тиждень і витримували при 4 ˚С, поки не використовували. 19

Продуктивність. Вага тіла (BW) та споживання корму (FI) за реплікацію реєструвались у дні 21 та 42, і ці значення використовувались для обчислення приросту ваги (WG), FI та конверсії корму (FCR) перепелиних курчат за періоди між днями 0-21, 21-42, а також для загального експерименту.

Тест на 1-хлор-2, 4-динітробензол (DNCB). У віці 42 днів розчин 1 мг мл -1 DNCB (Merck, Дармштадт, Німеччина) розподіляли і підтримували на 2 см 2 ділянки шкіри без пір'я (0,05 мл) з правого боку від двох птахів на клітку. Подібне положення на лівій стороні птиці, обробленої одним розчинником (ацетон: оливкова олія, 4: 1 об./Об.) Для корекції ефекту розчинника. Набряк шкіри розраховували як різницю між товщиною шкіри до та після обробки DNCB вимірювали за допомогою цифрового штангенциркуля. 20

Ін’єкція мітогену . У віці шести тижнів двом пташенятам з кожної клітини вводили мітогенний фітогемагглютинін (PHA-M; Gibco, Гранд-Айленд, США) в ліве крило внутрішньошкірно. Кожне курча отримувало 50 мкл суспензії 50 мкг PHA-M у 50 мкл фосфатно-сольового розчину. 21 Цифровий штангенциркуль (Мітутойо, Кавасакі, Японія) використовували для вимірювання товщини полотна крила перед ін'єкцією (як контрольний вимір) та через 24 години після ін'єкції для отримання набряку полотна крила у відповідь на мітоген. 22

Гуморальна імунна відповідь. Щеплення проти хвороби Ньюкасла (ND) проводили на сьомий день з використанням очних крапель (живий штам B1; Інститут Разі, Карадж, Іран) та підшкірної ін’єкції AI H9N2 21 дня (вакцини проти Ньюкасла та пташиного грипу; Інститут Разі) для всіх курчат. Як підсилювач, другу живу вакцину проти ND (штам La Sota) проводили через питну воду на день 23. Імунну відповідь оцінювали за допомогою тесту на інгібування гемаглютинації (HI). 23 Титри HI проти обох вакцин визначали на зразках сироватки тих самих птахів на 42-й день. Червоні кров'яні клітини овець (SRBC) збирали і тричі промивали сольовим розчином фосфатного буфера (PBS). Упаковані клітини доводили до 5,00% у стерильному розчині PBS. Пташенятам вводили в м’язи грудей SRBC (0,1 мл на курча), після чого виконували прискорену ін’єкцію на 28 та 35 дні відповідно. Зразки крові відбирали на 42-й день. Сироватку зберігали при - 20 ˚С до тестування. Рівні антитіл проти SRBC вимірювали за допомогою тесту HI. 24, 25

Визначення маси тіла та лімфоїдних органів . Забитих на 42 день птахів було випотрошено, а бурсу та селезінку вилучено та зважено. Індекс імунного органу виражався як вага органу у відсотках від органу до загальної маси тіла.

Оцінка співвідношення гетерофілів та лімфоцитів. Мазки крові для диференціальних показників лейкоцитів готували із застосуванням стандартної двокліпової процедури. Зразки сушили на повітрі, фіксували в метанолі та фарбували швидким фарбуванням Райт. Мазки досліджували, щоб отримати кількість лімфоцитів та гранулоцитів на 100 лейкоцитів. Отриману кількість клітин використовували для розрахунку відносної частки гетерофілів до лімфоцитів (співвідношення H/L). 26

Статистичний аналіз. Дані були проаналізовані за допомогою узагальненої лінійної моделі (GLM) для повністю рандомізованого експериментального проектування із сімома обробками та чотирма повторностями за допомогою SAS (версія 8.2; Інститут SAS, Кері, США), а середні показники порівняно за допомогою тесту Тукі. Значення р менше 0,05 вважали статистично значущим.

Результати

PE1: 1000 і PE2: 5000 мг кг -1 етанольний екстракт прополісу, PO1: 1000 і PO2: 5000 мг кг -1 пилкового порошку, RJ: 100 мг кг -1 маточного молочка, H: мед 22 г L -1, C: контроль та V: віргініаміцин 150 мг кг -1. SEM: Стандартна помилка середнього значення.

Таблиця 3

Порівняння між титруванням антитіл проти вірусу Нью-Касл (ND), вірусів H9N2 (AI) пташиного грипу та загального співвідношення червоних кров’яних клітин проти овець (SRBC) та гетерофільних/лімфоцитних (H/L) японських перепелів

ЛікуванняND (журнал 2 ПРИВІТ)AI (журнал 2 ПРИВІТ)SRBCH/L
PE1 6.00 a 3,50 а 1,50 б 0,16 c
PE2 3,60 б 4,25 а 1,75 аб 0,15 c
PO1 4,00 б 3,25 аб 1,75 аб 0,12 д
PO2 5,75 а 4,50 а 3,00 а 0,15 кд
RJ 3,75 б 3,75 а 2,50 аб 0,19 аб
V 3,50 б 4,00 а 1,50 б 0,22 а
H 4,75 аб 4,50 а 2,00 аб 0,17 до н
C. 3,50 б 2,00 б 1,50 б 0,21 а
SEM 0,1936 0,1694 0,1265 0,008
стор -значення 0,00010,00010,00630,0001

PE1: 1000 і PE2: 5000 мг кг -1 етанольний екстракт прополісу, PO1: 1000 і PO2: 5000 мг кг -1 пилкового порошку, RJ: 100 мг кг -1 маточного молочка, H: мед 22 г L -1, C: контроль та V: віргініаміцин 150 мг кг -1. SEM: Стандартна помилка середнього значення.

PE1: 1000 і PE2: 5000 мг кг -1 етанольний екстракт прополісу, PO1: 1000 і PO2: 5000 мг кг -1 пилкового порошку, RJ: 100 мг кг -1 маточного молочка, H: мед 22 г L -1, C: контроль та V: віргініаміцин 150 мг кг -1. SEM: Стандартна помилка середнього значення.

Обговорення

Маточне молочко містить багато флавоноїдів, органічних сполук та жирних кислот. Ці компоненти можуть покращити показники зростання перепелів, що призводить до збільшення BW, FI та нижчого FCR. Раніше повідомлялося про вплив активних інгредієнтів, особливо флавоноїдів, на продуктивність перепелів в стресових умовах. 37

Результати цього дослідження показали, що титри антитіл у більшості груп лікування на кожен момент часу були вищими, ніж титри контрольної групи, що свідчить про те, що вони можуть підвищувати гуморальний імунітет. Попередні дослідження показали, що флавоноїди мають імунодепресорну дію на лімфопроліферативну відповідь. 43 Згідно з цим дослідженням, мікроелементи, що входять до складу натуральної добавки меду та маточного молочка, додані у питну воду перепелів, етанольний екстракт прополісу та пилок в порошку, додані в раціон, можуть покращити ефективність та розвиток імунної системи японських перепелів.

З наших результатів можна зробити висновок, що добавки H, PE2 та PO2 збільшують BW, масу лімфоїдних органів та титр антитіл у японських перепелів. Це може бути пов’язано з антимікробною та імуностимулюючою активністю продуктів бджільництва. Це відкриває перспективне використання меду, пилку та прополісу як кормової добавки для поліпшення продуктивності птиці.

Подяка

Автори щиро дякують кафедрі птахівництва сільськогосподарського факультету Університету Тарбіат Модарес за фінансування цього проекту.