Гіполіпідемічна та антиоксидантна дія суміші листя та квітів гречки у гіперліпідемічних щурів

Мая Джурендіч - Бренезель

1 Інститут судової медицини Клінічного центру Воєводина, Хайдук Велькова 7-9, 21000 Нові Сад, Сербія

Тамара Попович

2 Інститут медичних досліджень, Лабораторія харчування та обміну речовин, Белградський університет, Тадеуша Костюшка 1, 11000 Белград, Сербія

Володимир Пілія

1 Інститут судової медицини Клінічного центру Воєводина, Хайдук Велькова 7-9, 21000 Нові Сад, Сербія

Олександра Арсіч

Мілян Міліч

3 Центр патології та гістології, Клінічний центр Воєводина, Хайдук Велькова 1-3, 21000 Нові Сад, Сербія

Даніела Коїч

4 Кафедра біології та екології, Факультет наук, Університет Нового Саду, Trg Dositeja Obradovića 3, 21000 Новий Сад, Сербія

Нікола Йоїч

5 Кафедра фармації, Медичний факультет, Новий Сад, Хайдук Велькова, 3, 21000 Нові Сад, Сербія

Наташа Міліч

5 Кафедра фармації, Медичний факультет, Новий Сад, Хайдук Велькова, 3, 21000 Нові Сад, Сербія

Анотація

Гречка як джерело біологічно активних сполук має сприятливий вплив на харчування завдяки високому вмісту флавоноїдів, особливо рутину.

Метою нашого дослідження було вивчити вплив гречки на рівень ліпідів у плазмі крові та склад жирних кислот фосфоліпідів, гістологічний та параметри окисного стресу у щурів Wistar, які харчуються з високим вмістом жиру. Це дослідження показало, що додавання суміші з листя і квітів гречки (BLF) суттєво зменшує збільшення ваги, концентрацію ліпідів у плазмі крові та атерогенний індекс у щурів, які харчуються дієтою з високим вмістом жиру. Обробка групи жирних тварин гречкою суттєво збільшила відсоток n-6 жирних кислот, а також ейкозапентаенової кислоти (EPA) та зменшила відсоток насичених жирних кислот (SFA) та олеїнової кислоти. Гречана антиоксидантна дія зменшила негативний вплив дієти з високим вмістом жиру у гіперліпідемічних щурів, тоді як патогістологічний аналіз печінки підтвердив зміни після споживання жиру. Наші результати показали гіполіпідемічні, антиатерогенні та антиоксидантні особливості листя і квіткової суміші гречки, і ці частини рослини з найбільшим вмістом рутину можуть бути корисними для профілактики та лікування гіперліпідемії.

ВСТУП

МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ

Рослинний матеріал

Частини листя та квітки гречки (Fagopyrum esculentum - Moench) (BLF) у вигляді висушеного порошку були отримані в Інституті досліджень лікарських рослин «Доктор Йосиф Панчич», Белград, Сербія, де зберігався зразок ваучера (№ 31210911). Вміст поліфенолів у суміші BLF становив: рутин 4,99%, кверцетин 0,04%, гіперозид 0,39%, галова кислота 0,09%, протокатехунова кислота 0,04%, кавова кислота 0,11%, катехін 0,01% та хлорогенова кислота 0,16% (мас./Мас.), Визначено з використанням високоефективна рідинна хроматографія з виявленням діодного масиву (ВЕРХ/DAD) [9].

Експериментальні тварини та дієти

ТАБЛИЦЯ 1

Склад експериментальних дієт.

Біохімічний аналіз

Рівні загального холестерину в плазмі крові (TC) та тригліцеридів (TG), аланінтрасамінази (ALT) та аспартат трансамінази (AST) вимірювали за допомогою автоматизованих ферментативних методів (EliTech Diagnostic, Sees, Франція). Після осадження фосфовольфрамовою кислотою та хлоридом магнію вимірювали холестерин ліпопротеїдів високої щільності плазми (ЛПВЩ) [11]. Холестерин ліпопротеїдів низької щільності (ЛПНЩ) розраховували за формулою Friedewald et al. [12]. Фракцію PL виділяли з екстрагованих ліпідів за допомогою одновимірної тонкошарової хроматографії (ТШХ) за допомогою системи нейтральних ліпідних розчинників гексан-діетилового ефіру-μ оцтової кислоти (87: 2: 1, об./Об.) З використанням пластин на силікагелі GF ( К. Мерк, Дармштадт, Німеччина). Екстракцію, приготування метилових ефірів ФА та аналіз газової хроматографії (ГХ) проводили, як описано раніше [13]. Порівнюючи час пікового утримування зразка з автентичними стандартами (Sigma Chemical Co, Сент-Луїс, Міссурі, США) та/або стандартною сумішшю PUFA-2 (Supelco Inc., Belleforte, PA, USA) було виявлено окремі метилові ефіри FA. Пероксидне окислення ліпідів у печінці, антиоксидантна активність ферментів та аналізи знешкодження вільних радикалів

Патогістологічний аналіз

Фіксовані тканини (аорта, серце, печінка, нирки та мозок) регулярно обробляли для вбудовування парафіну, а зрізи 4 мкм готували і фарбували гематоксилін-еозином, фарбовані ділянки переглядали за допомогою оптичного мікроскопа зі збільшувальною силою x 100 та x 400.

Статистичний аналіз

Рівні DPPH (IC50) (A) та MDA (B) у контрольних та експериментальних групах щурів. Значення виражаються як середнє значення ± SD. Засоби з однаковими буквами суттєво не відрізняються на p Рисунок 3), порівняно з тваринами, які регулярно харчуються (I група, Рисунок 4). Гістологія інших органів залишалася нормальною. Гістологічні дані органів були нормальними у тварин, яких годували звичайною їжею, збагаченою сумішшю BLF (I та II група), після 13 тижнів експерименту (рисунки (малюнки 5 5 та 6). 6). Суттєві зміни спостерігались у печінці тварин III, IV та V групи. Грубо, печінка була збільшена, м’якша, жовтувата та жирна. Інші обстежені органи грубих змін не мали. Патогістологічні дані у зразках печінки, отриманих у групах ВЧ тварин, корелюють зі стеатогепатитом: жирова дистрофія цитоплазми гепатоцитів (приблизно 70% гепатоцитів), переважно мікровезикулярного типу, легкий та помірний одноядерний запальний інфільтрат у портальних трактах, групи лімфоцитів всередині печінково-часточкової паренхіми (часточна запальна активність) та розрив ендотелію в кількох центральних венах (Фігури (Рисунки 7 7 - -10 10).

Периаортальна жирова тканина (III група), ВІН х 400.